河南农业大学学报

2020, v.54;No.220(04) 630-637

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猪细小病毒NS1蛋白65-133位氨基酸缺失对其核定位的影响
Effect of amino acid 65-133 deletion of porcine parvovirus NS1 protein on its nuclear localization

张驰;徐盟龙;袁一心;王朋涛;靳晓慧;魏战勇;

摘要(Abstract):

为了探究猪细小病毒NS1蛋白入核机制,通过生物信息学网站预测PPV NS1核定位序列,根据GenBank上传的PPV非结构蛋白NS1的序列设计NS1扩增引物和一系列重叠PCR引物,以河南省动物性食品安全重点实验室保存的猪细小病毒DNA为模板,扩增NS1和缺失突变体基因,构建真核表达重组质粒pCAGGS-HA-NS1、pCAGGS-HA-NS1_(65-133aaDel)、pCAGGS-HA-NS1_(207-267aaDel)。将其转染至PPV易感猪源细胞系PK-15细胞,通过免疫荧光和Western-blot鉴定NS1和不同的NS1缺失突变体在细胞内的核定位情况。结果表明,pCAGGS-HA-NS1、pCAGGS-HA-NS1_(65-133aaDel)、pCAGGS-HA-NS1_(207-267aaDel)编码蛋白均成功表达。免疫荧光和Western-blot显示NS1和NS1_(207-267aaDel)蛋白定位于细胞核,而NS1_(65-133aaDel)蛋白的细胞定位较NS1发生改变,由细胞核定位改变为细胞质定位,说明PPV NS1蛋白65-133位氨基酸缺失能改变其在细胞内的核定位,PPV NS1蛋白核定位序列NLS存在于NS1的65-133aa处。

关键词(KeyWords): 猪细小病毒;NS1蛋白;核定位

Abstract:

Keywords:

基金项目(Foundation): 国家自然科学基金面上项目(31772722);; 河南省高等学校重点科研项目(18A230001)

作者(Author): 张驰;徐盟龙;袁一心;王朋涛;靳晓慧;魏战勇;

Email:

DOI: 10.16445/j.cnki.1000-2340.2020.04.010

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